根據(jù)物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的單色輻射光所產(chǎn)生的特征吸收峰,可以根據(jù)比爾定律對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性與定量的分析。而紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)就是一款結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、操作便利的物質(zhì)光譜分析設(shè)備。其憑。借廣泛的使用范圍和較高的靈敏度,被大量應(yīng)用在各個(gè)領(lǐng)域。
2 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)中的常見(jiàn)誤差來(lái)源
2.1 波長(zhǎng)檢定中的誤差。引起波長(zhǎng)誤差的因素很多,可以按照產(chǎn),生原因分為波長(zhǎng)標(biāo)準(zhǔn)所引起的誤差和設(shè)備結(jié)構(gòu)所引起的誤差兩類。在利用光吸收定律進(jìn)行物質(zhì)光譜特性檢測(cè)時(shí),需要選擇一束理論上具備特定波長(zhǎng)的單色光。但實(shí)際由儀器所提供的單色光,其波長(zhǎng)是具備帶寬的單峰曲線,所選擇單色光的波長(zhǎng)所造成的誤差就會(huì)影響儀器測(cè)量的準(zhǔn)確性;另外,由儀器單色系統(tǒng)的調(diào)整狀態(tài)所引起的誤差,也會(huì)造成波長(zhǎng)示值的不準(zhǔn)確。但以上兩類誤差都是可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)和調(diào)整來(lái)減小甚至消除的。還有一類誤差是伴隨儀器的制造缺陷產(chǎn)生的,這樣的誤差不能通過(guò)使用時(shí)的調(diào)整來(lái)進(jìn)行消除。
2.2 雜散光所引起的誤差。雜散光是指非待測(cè)光以外的其他光源所發(fā)出的光,其會(huì)對(duì)測(cè)量結(jié)果造成較大誤差。雜散光通常會(huì)以兩種形式出現(xiàn):一種是與測(cè)量波長(zhǎng)相同的光,由于設(shè)備的光學(xué)元件自身發(fā)生了反射會(huì)散射,使得光線不通過(guò)檢測(cè)樣品而直接投射到檢測(cè)器上;另一種則是待測(cè)波長(zhǎng)以外的光線,其是由于光學(xué)系統(tǒng)自身的缺陷,如光學(xué)元件表面的灰塵、擦痕,或結(jié)構(gòu)中出現(xiàn)了額外的反射、透射面,使得設(shè)計(jì)外的光線沿光路到達(dá)檢測(cè)器。
2.3 檢測(cè)環(huán)境所引起的誤差。檢測(cè)環(huán)境的溫度、濕度等條件,對(duì)檢定結(jié)果準(zhǔn)確性有著明顯的影響。例如單色光光源系統(tǒng)要避免雜色的干擾,因此需要嚴(yán)格的密封措施,避免出現(xiàn)強(qiáng)光直射的問(wèn)題。靈敏的光學(xué)元件對(duì)環(huán)境的清潔程度也有要求,環(huán)境中的灰塵過(guò)大,會(huì)使得元器件受到污染,引起誤差。
3 常見(jiàn)誤差的控制方法
3.1 波長(zhǎng)檢定誤差的控制。波長(zhǎng)檢定誤差,可以用檢定波長(zhǎng)準(zhǔn)確用儀器設(shè)備時(shí),要嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行,如在光度計(jì)開機(jī)后必須進(jìn)行充分預(yù)熱,等待電路與光路系統(tǒng)穩(wěn)定,以減小所引入的誤差。同時(shí)要經(jīng)常對(duì)設(shè)備進(jìn)行開進(jìn)保養(yǎng),對(duì)濾光片等標(biāo)準(zhǔn)元器件,要備很好的分離性,強(qiáng)度也足夠大,用來(lái)進(jìn)行波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的檢定為適宜。根據(jù)經(jīng)驗(yàn)來(lái)看,要想將誤差控制在允許范圍內(nèi),在不同的保證定期送檢,確保檢定標(biāo)準(zhǔn)自身的準(zhǔn)確性。對(duì)檢定工作人員自波段需要使用不同的濾光片來(lái)控制標(biāo)準(zhǔn)波長(zhǎng)。在200~700nm之間身來(lái)講,要加強(qiáng)對(duì)檢定規(guī)程的學(xué)習(xí),定期總結(jié)工作中出現(xiàn)的問(wèn)題,宜使用的是鈥濾光片,而在700~900nm則更適合使用鐠釹濾光探討和提升自身的技術(shù)水平。片。如果波長(zhǎng)誤差超出規(guī)定的范圍,則必須對(duì)設(shè)備進(jìn)行調(diào)修:如果誤差是線性的,即不同波長(zhǎng)段的誤差方向相同且數(shù)值相近,應(yīng)的調(diào)修方法為先將波長(zhǎng)調(diào)至580nm,在樣品池的光路中觀察單色光的顏色,并調(diào)節(jié)其波長(zhǎng)使得單色光成為邊緣清晰沒(méi)有雜色的橙黃色。再將刻度盤螺母旋鈕旋轉(zhuǎn)至580nm。
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